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蛋白質(zhì)純化的主要方法
2019-01-03
蛋白質(zhì)的分離純化在生物化學(xué)研究應(yīng)用中使用廣泛,是一項重要的操作技術(shù)。一個典型的真核細(xì)胞可以包含數(shù)以千計的不同蛋白質(zhì),一些含量十分豐富,一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質(zhì),必須先將該蛋白質(zhì)從其他蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)分子中純化出來。蛋白質(zhì)純化主要方法(1)根據(jù)分子大小不同的分離方法:透析和超過濾(利用蛋白質(zhì)分子不能通過半透膜的性質(zhì));密度梯度離心(蛋白質(zhì)在介質(zhì)中離心時質(zhì)量和密度較大的顆粒沉降較快);凝膠過濾(一種柱層析)(2)利用溶解度差別分離:等電點沉淀法(由于蛋白質(zhì)分子在等...
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關(guān)于潮霉素的用途說明
2018-12-14
潮霉素,鏈霉菌產(chǎn)生的氨基糖苷類抗生素,有A,B兩組分。A:白色粉末,熔點105~109℃,旋光度[α]D25-126°(c=1,水)。易溶于水與甲醇,不溶于非極性溶劑??梢砸种普婧撕驮松锏亩嚯暮铣?,對金葡菌209P、肺炎桿菌與人型結(jié)核桿菌的小抑菌濃度MIC為25、12.5與1.56μg/ml,對勾端螺旋體、支原體亦有作用。B:同越霉素A。潮霉素B的用途:(1)豬潮霉素B長期飼喂能有效地控制豬蛔蟲、食道口線蟲和毛線蟲感染,這是因為本品不僅對成蟲、幼蟲有效,而且還能抑制雌蟲產(chǎn)...
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淋巴細(xì)胞分離液的使用說明
2018-12-03
淋巴細(xì)胞分離液為Ficoll、羥乙基淀粉550與泛影酸葡甲胺的混合液??鼓庵苎稍诜蛛x液中分層。離心時,在Ficoll、羥乙基淀粉的作用下紅細(xì)胞與粒細(xì)胞聚集并迅速沉降;此時,淋巴細(xì)胞及其他單個核細(xì)胞仍處于分離液上層,紅細(xì)胞污染可忽略不計。大部分血小板可在細(xì)胞清洗低速離心過程中去除。其他人及動物多種比重細(xì)胞分離液,因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,用戶在制定分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細(xì)胞的名稱。1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合2.無菌...
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生物緩沖液的原理介紹
2018-11-13
生物緩沖液原理:由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強酸時,H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強堿時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時,緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1...
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抗生素的作用機制和過程
2018-11-02
作用機制抗生素殺菌作用主要有4種機制:抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成、與細(xì)胞膜相互作用、干擾蛋白質(zhì)的合成以及抑制核酸的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制抑制。作用過程(1)抑制細(xì)胞壁的合成抑制細(xì)胞壁的合成會導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞破裂死亡,以這種方式作用的抗菌藥物包括青霉素類和頭孢菌素類,哺乳動物的細(xì)胞沒有細(xì)胞壁,不受這些藥物的影響。細(xì)菌的細(xì)胞壁主要是肽聚糖,而合成肽鏈的細(xì)胞器為核糖體,核糖體是細(xì)菌的細(xì)胞器。但是使用頻繁會導(dǎo)致細(xì)菌的抗藥性增強。這一作用的達(dá)成依賴于細(xì)菌細(xì)胞壁的一種蛋白,通常稱為青霉素結(jié)合蛋白(PBPs),...
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標(biāo)準(zhǔn)品與對照品的區(qū)別
2018-10-17
標(biāo)準(zhǔn)品與對照品的區(qū)別1.標(biāo)準(zhǔn)品,即是標(biāo)準(zhǔn)物品,作為一種衡量標(biāo)準(zhǔn),如果用在藥物方面,則為含量測定中的標(biāo)準(zhǔn)含量。標(biāo)準(zhǔn)品包括化學(xué)計量標(biāo)準(zhǔn)品、冶金標(biāo)準(zhǔn)品和藥檢標(biāo)準(zhǔn)品。采用生化方法來測定,目前國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)品共有15種,林可酶素、新霉素、大觀酶素、太樂菌素、鏈霉素、卡那霉素、絨促性素、鹽酶素、桿菌肽鋅、吉他酶素、安普酶素、紅霉素、合成縮宮素、慶大霉素、渡毛化苷G。2.對照品,是指用于鑒別、檢查、含量測定和校正檢定儀器性能的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。采用化學(xué)方法來測定,即是一般儀器的都叫做對照品,國家規(guī)...
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人胰島素的介紹及用法用量
2018-10-09
人胰島素是利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)出來的。是利用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)與天然胰島素有相同的結(jié)構(gòu)和功能??烧{(diào)節(jié)糖代謝,促進肝臟、骨骼和脂肪組織對葡萄糖的攝取和利用,促進葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)樘窃A存于肌肉和肝臟內(nèi),并抑制糖原異生。用法用量:1、本品為無色或幾乎無色的澄明液體,于餐前15分鐘左右皮下注射,但需由醫(yī)生根據(jù)每位患者的病情決定適宜的注射時間。2、準(zhǔn)備胰島素的方法:按照東寶筆的使用方法,將東寶筆芯正確裝入筆芯架后,再安裝好東寶針。轉(zhuǎn)動劑量調(diào)節(jié)旋鈕,調(diào)節(jié)到所需的劑量。取下針帽,排盡氣泡后,即...
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培養(yǎng)基的配制說明
2018-10-09
培養(yǎng)基的配制1.配料配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2.溶解淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3.調(diào)PH用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4.過濾濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)5.分裝一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶若作靜置培養(yǎng),則100ml培...