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細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒的使用方法
2018-06-29
細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒(MDC法)使用說(shuō)明產(chǎn)品說(shuō)明:自噬(autophagy)是細(xì)胞受到刺激后吞噬自身的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞器,終將吞食物在溶酶體內(nèi)降解的過(guò)程,自噬體(autophagosome)為雙層膜包被的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu),內(nèi)含細(xì)胞質(zhì)、長(zhǎng)壽蛋白質(zhì)和異常蛋白聚集物,損傷或多余細(xì)胞器如線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和微體、病毒和細(xì)菌等。單丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC)是一種熒光色素,是嗜酸性染色劑,通常被用于檢測(cè)自噬體形成的特異性標(biāo)記染色劑,其檢測(cè)激發(fā)濾光片波長(zhǎng)355nm...
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ECL Plus超敏發(fā)光液使用方法
2018-06-29
ECLPlus超敏發(fā)光液使用方法:1、常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針?lè)跤⑾茨ぁW⒁庥肏RP標(biāo)記IgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾心法。核酸雜交膜用HRP標(biāo)記探針雜交,洗膜。2、在洗滌膜上的HRP標(biāo)記二抗的同時(shí),新鮮配制發(fā)光工作液:分別取等體積的溶液A和B混合,放置使之恢復(fù)室溫否則會(huì)減弱熒光強(qiáng)度。建議立即使用工作液,室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有減低。3、用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥。將膜*浸入并與發(fā)光工作液充分接觸(約0.125ml...
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線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒的作用說(shuō)明
2018-06-19
產(chǎn)品作用1、線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒是一種以JC-1為熒光探針,快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。2、通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降,同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。3、JC-1是一種檢測(cè)線粒體膜電位的理想熒光探針。在線粒體膜電位較高時(shí),JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中,形成聚合物,產(chǎn)生紅色熒光;4、在線粒...
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神奇濾布的作用說(shuō)明
2018-06-04
基因工程轉(zhuǎn)化真菌和一些土壤細(xì)菌時(shí),往往需要先消化掉厚厚的細(xì)胞壁,制備分離原生質(zhì)體以便進(jìn)行轉(zhuǎn)化,即使是大家很熟悉的酵母轉(zhuǎn)化,當(dāng)簡(jiǎn)便的醋酸鋰方法不起作用時(shí),原始也是有效方法還是原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化。當(dāng)經(jīng)過(guò)消化處理的菌體混合液經(jīng)過(guò)Miracloth過(guò)濾后,就可以去掉未被消化*的菌體和雜質(zhì),分離得到的“裸露的”原生質(zhì)體就可以準(zhǔn)備進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者電轉(zhuǎn)了。如果沒(méi)有這一步的分離,未*消化的菌體由于生長(zhǎng)迅速,會(huì)嚴(yán)重干擾結(jié)果。植物基因組純化相對(duì)比較麻煩一點(diǎn),市面上有不少試劑盒可供選擇,多數(shù)純化基因組DNA...
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活性氧檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備說(shuō)明
2018-05-17
活性氧檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備說(shuō)明試劑準(zhǔn)備:1.DCFH-DA可稀釋于培養(yǎng)基或緩沖液中。血清或培養(yǎng)基顏色并不影響DCFH-DA及細(xì)胞內(nèi)熒光產(chǎn)生,但可能會(huì)影響熒光顯微鏡觀察,干擾熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀熒光測(cè)定。可將DCFH-DA稀釋于無(wú)酚紅培養(yǎng)基或適宜的緩沖液如PBS中。這依賴于使用何種熒光設(shè)備進(jìn)行測(cè)定。2.加入DCFH-DA的時(shí)機(jī)或孵育時(shí)間,以終能順利檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧為目的。藥物處理時(shí)間較短(6小時(shí))或預(yù)計(jì)產(chǎn)生ROS效應(yīng)較強(qiáng),可后加DCFH-DA。3.活性氧供體含高...
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胰蛋白酶消化液的配制及注意事項(xiàng)
2018-05-04
胰蛋白酶消化液的配制及注意事項(xiàng)胰蛋白酶消化液的配制(1)在D-Hanks液高壓滅菌之后,晾室溫,4℃保存?zhèn)溆谩#?)稱取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天時(shí)研磨器應(yīng)放在冰浴中),加入少量D-Hanks液碾磨100~1000次,調(diào)制成糊狀。再放入4℃預(yù)冷的適量D-Hanks液中,4℃下磁力攪拌使*溶解(一般4~12h)。(3)用NaHCO3干粉將胰酶溶液的pH調(diào)8.0左右(胰酶作用的適pH為8.2)。(4)過(guò)濾除菌(方法見(jiàn)前篇培養(yǎng)基的配制),—20℃保存。注意事項(xiàng):1.由于組織...
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如何選擇合適的透析袋
2018-04-27
正確選擇合適的截留分子量截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。為達(dá)到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率少為25.選擇截留分子量的經(jīng)驗(yàn)法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得少90%的保留率。正確選擇扁平寬度透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴(kuò)散距離較長(zhǎng)透析較慢。為易于使用,建議使用總長(zhǎng)(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的透析袋透析袋的化學(xué)...
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蛋白電泳 SDS-PAGE及Western blot
2018-04-13
蛋白電泳SDS-PAGE原理SDS是一種陰離子表面活性劑,能打斷蛋白質(zhì)的氫鍵和疏水鍵,并按一定的比例和蛋白質(zhì)分子結(jié)合成復(fù)合物,使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其本身原有的電荷,掩蓋了各種蛋白分子間天然的電荷差異。因此,各種蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物在電泳時(shí)的遷移率,不再受原有電荷和分子形狀的影響,而只是棒長(zhǎng)的函數(shù)。這種電泳方法稱為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(簡(jiǎn)稱SDS—PAGE)。實(shí)驗(yàn)使用過(guò)程中,還加入DTT或者巰基乙醇,以打開(kāi)蛋白間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。SDS—PAGE常采...